中药资源与栽培

不同激素配比对明党参叶片愈伤组织诱导的影响及其总香豆素的含量测定△步达 ,姚晓，刘晓艺，李祥，陈建伟 (南京中医药大学药学院，南京 2 1 0 0 4 6 )中图分类号 R 2 8 4 . 1; R 9 2 7 . 2 文献标志码 A 文章编号 1 0 0 1— 0 4 0 8 ( 2 0 1 3 ) 1 9— 1 8 0 6 . 0 4D O1 1 0 . 6 0 3 9/ j . i s s n . 1 0 0 1— 0 4 0 8 . 2 0 1 3 . 1 9 . 2 8

摘要目的：考察不同激素配比对明党参叶片愈伤组织诱导的影响；建立测定明党参叶片愈伤组织中总香豆素含量的方法。方 法：采用 L。 ( 3 )正交试验设计不同激素对明党参叶片愈伤组织的诱导体系；以出愈率和生长状况为指标，考察不同激素配比对愈伤组织诱导的影响。以珊瑚菜内酯为指标性成分，检测波长为 2 6 8 a m,采用紫外.可见分光光度法测定愈伤组织中总香豆素的含

量。结果：以Ms培养基+ 2, 4 .二氯苯氧乙酸0 . 5 mg/ L+ 6 .糠氨基嘌吟 0 . 2 mg/ L+ 1 .萘乙酸 1 . 5 mg/ L+ 6 .苄氨基腺嘌呤 O . 5 mg/ L的激素组合对明党参叶片愈伤组织的诱导效果较好，培养 1 4 d左右的出愈率即达到 1 0 0%,且生长状况也较好。珊瑚菜内酯的质量浓度在 4 . 0 6~l 1 . 6 0¨ g/ L范围内与吸光度呈良好的线性关系( r=0 . 9 9 4 8 );平均加样回收率为 1 0 3 . 1 5%, R S D=2 . 0 4%( n=6 )。结论： 该方法操作简便、快捷，结果准确，可用于明党参叶片愈伤组织中总香豆素的含量测定，也可为明党参愈伤组织诱导的激素配比选择提供依据。

关键词

明党参；愈伤组织；珊瑚菜内酯；紫外一可见分光光度法；含量测定；激素诱导

De t e r mi na ion t o f To t a l Co um a r i ns i n Le a f Ca l l us I nduc io t n o f Cha n gi um s myr ni o i d e s by UV S pe c t r o pho t o me—t r y

B U D a, Y A O Xi a o, L I U Xi a o - y i, L I Xi a n g, C HE N J i a n— we

i ( C o l l e g e o f P h a r ma c y, Na n j i n g U n i v e r s i t y o f T C M, Na n j i n g 2 1 0 0 4 6,C h i n a )ABS TRACT OBJ E CTI VE: T o i n v e s t i g a t e t h e e fe c t s o f d i fe r e n t p r o p o r t i o n s o f h o r mo n e o n l e a f c a l l u s i n d u c t i o n o f C h a n g i u m s m y r n i o i d e s . a n d t o e s t a b l i s h a me ho t d f o r he t d e t e m i r n a t i o n o f t h e t o t a l c o u ma r i n s i n l e a f c a l l u s i n d u c t i o n o f e s m y r n i o i d e s .

MET HODS: T h e s y s t e m o f d i f f e r e n t h o r mo n e s i n d u c i n g l e a f c a l l u s o f C s m y r n i o i d e s wa s d e s i g n e d wi血 L。 ( 3 )o th r o g o n a 1 t e s t;wi t h c a l l u s i n d u c t i o n r a t e nd a g r o wt h a s i n d e x.t he e fe c t s o f d i fe r e n t p r o p o r t i o n s o f h o r mo n e o n l e a f c a l l u s i n d u c t i o n . Wi t h v h e l— l o p t e r i n a s i n d e x c o mp o n e n t,t h e c o n t e n t o f c o u ma r i n s i n c a l l u s wa s d e t e c t e d b y UV s p e c t r o p h o t o me t r y a t 2 6 8 a m. RES UL] f S: MS c u l t u r e me d i u m+2 . 4 . D 0 . 5 mg/ L+ KT 0 . 2 mg/ L+ NAA 1 . 5 mg/ L+6一 BA O . 5 mg/ L s h o we d s o u n d i n d u c

t i o n e fe c t o n l e a f c a l l u s o f C s m y r n i o i d e s:c a l l u s i n d u c t i o n r a t e r e a c h e d 1 0 0% a b o u t 1 4 d a y s l a t e r,a n d l e a f c a l l u s o f C s m y r n i o i d e s h a d ro g wn we l 1 . T h e l i n e a r

r ng a e o f p h e l l o p t e r i n wa s 4 . 0 6 . 1 1 . 6 O ug/ L( r=0 . 9 9 4 8)wi t h a n a v e r a g e r e c o v e r y o f 1 0 3 . 1 5% ( RS D=2 . O 4%,"=6 ) .C0NCL U.S 1 0NS: T h e me t h o d i s s i mp l e .r a p i d nd a a c c u r a t e or f t h e c o n t e n t d e t e m i r n a t i o n o f t h e t o t a l c o u ma r i n s i n l e a f c a l l u s o f C s mv r n i o i— d e s . I t a l s o c a n p r o v i d e r e f e r e n c e or f t h e s e l e c t i o n o f h o r mo n e p r o p o r t i o n or f l e a f c a l l u s i n d u c t i o n o f C s m￣ r n i o i d e s .

KEY W oRDS Ch a n g i u m s m y r n i o i d e s;Ca l l u s;P h e l l o p t e r i n;UV s p e c t r o p h o t o me t r y;C o n t e n t d e t e m i r n a t i o n:Ho r mo n e i n d u c t i o n

明党参 ( C h a n g i u m s m y r n i o i d e s Wo l f )为伞形科多年生草

本植物，根人药，又名土人参、百丈光、粉沙参等，为名贵中药材之一。它具有润肺化痰、和胃、解毒的功效，主治咳嗽痰喘、呕吐反胃、头晕、白带多、疔毒疮疡n 。珊瑚菜内酯是明党参中

法测定明党参叶片愈伤组织中总香豆素的含量，以期优化明党参愈伤

组织的诱导体系，为改良明党参的种质资源提供试验依据。

1材料1 . 1仪器

新发现的有药理活性的香豆素类成分之一，体外试验表明，它能抑制 I (+和谷氨酸诱导的 P C 1 2细胞 C a 2 内流增加以及咖啡因和环匹阿尼酸 ( C P A)诱导的 P C1 2细胞 C a 2 的释放 1,抑制前列

7 5 2紫外.可见分光光度计、 F A . 1 0 0 4电子分析天平 (上海天平仪器厂 ); L I B R OR AE L . 4 0 S M电子分析天平、 UV - 2 4 0 1紫外

腺素 E 的产生，调节肿瘤坏死因子n刺激人体经脉内皮细胞黏附分子的表达 1,抑制中枢神经系统苯二氮革受体，促进脂肪细胞脂解作用，明显抑制 7种肿瘤细胞的生长。笔者参照文献 1,以珊瑚菜内酯为指标成分，采用紫外 .可见分光光度△基金项目：教育部高等学校博士点基金项目( N o . 2 0 0 8 0 3 1 5 0 0 0 9 );

扫描仪(日本 S h i ma d z u公司); KQ . 5 0 0 D E医用数控超声波清洗器(昆山市超声仪器 …… 此处隐藏：11504字，全部文档内容请下载后查看。喜欢就下载吧 ……