环境工程微生物学第六章微生物的生长繁殖

第三版周群英著

第六章 微生物的生长繁殖 第一节 微生物生长的测定 第二节 细菌的群体生长繁殖 第三节 微生物生长繁殖的控制 第四节 菌种的退化、复壮与保藏

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生长： 繁殖：

生物个体物质有规律地、不可逆增加，导致个体 体积扩大的生物学过程。 生物个体生长到一定阶段，通过特定方式产生新的 生命个体，即引起生命个体数量增加的生物学过程。

生长是一个逐步发生的量变过程， 繁殖是一个产生新的生命个体的质变过程。

在高等生物里这两个过程可以明显分开，但在低等特别是 在单细胞的生物里，由于细胞小，这两个过程是紧密联系 又很难划分的过程。

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一个微生物细胞 合适的外界条件，吸收营养物质，进行代谢。

如果同化作用的速度超过了异化作用个体的生长 原生质的总量(重量、体积、大小)就不断增加 如果各细胞组分是按恰当的比例增长时，则达到一定程度后就 会发生繁殖，引起个体数目的增加。 群体内各个个体的进一步生长

群体的生长

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微生物生长:

在微生物学中提到的“生长”,一般均指群体生长，这一点与 研究大生物时有所不同。

群体生长 = 个体生长 + 个体繁殖

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第一节 微生物生长的测定 微生物生长： 单位时间里微生物数量或生物量(Biomass)的变化 个体计数 微生物生长的测定 群体重量测定 群体生理指标测定 评价培养条件、营养物质等对微生物生长的影响； 评价不同的抗菌物质对微生物产生抑制(或杀死)作用的效果；

客观地反映微生物生长的规律；

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第一节 微生物生长的测定

一 以数量变化对微生物生长情况进行测定

通常用来测定细菌、酵母菌等单细胞微生物的生长情况 或样品中所含微生物个体的数量(细菌、孢子、酵母菌) 1、培养平板计数法

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第一节 微生物生长的测定

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采用培养平板计数法要求操作熟练， 否则难以得到正确的结果： 样品充分混匀； 每支移液管及涂布棒只能接触一个 稀释度的菌液；

同一稀释度三个以上重复,取平均值； 每个平板上的菌落数目合适，便于 准确计数；

一个菌落可能是多个细胞一起形成，所以在科研中一般用 菌落形成单位(colony forming units, CFU)来表示，而 不是直接表示为细胞数。

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一 以数量变化对微生物生长情况进行测定 2、膜过滤培养法

当样品中菌数很低时，可以将一定体积的湖水、海水或饮用水等样 品通过膜过滤器，然后将将膜转到相应的培养基上进行培养，对形 成的菌落进行统计。

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一 以数量变化对微生物生长情况进行测定 3、The most probable number method(MPN法 最大可能数法)

对未知样品进行十倍稀释，然后根据估算取三个连续的稀释度 平行接种

多支试管，对这些平行试管的微生物生长情况进行统 计，长菌的为阳性，未长菌的为阴性，然后根据数学统计计算 出样品中的微生物数目。

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一 以数量变化对微生物生长情况进行测定 4、显微镜直接计数法 1)常规方法： 采用细菌计数板或血球计数板，在显微镜下对微生物数量进行直接 计数(计算一定容积里样品中微生物的数量)。

缺点： 不能区分死菌与活菌；

不适于对运动细菌的计数； 需要相对高的细菌浓度； 个体小的细菌在显微镜下难以观察；

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一 以数量变化对微生物生长情况进行测定

4、显微镜直接计数法

2)其它方法： 过滤计数：可以将一定体积的湖水、海水或饮用水等样品通过膜过滤器。然后将 滤膜染色，再在显微镜下计算膜上(或一定面积中)的细菌数；

活菌计数：采用特定的染色技术也可分别对活菌和死菌进行分别计数

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第一节 微生物生长的测定

二 以生物量为指标测定微生物的生长

1、比浊法 在一定波长下，测定菌悬液的光密 度，以光密度(optical density, 即O.D.) 表示菌量。 实验测量时应控制在菌浓度与光密度 成正比的线性范围内，否则不准确。

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第一节 微生物生长的测定 二 以生物量为指标测定微生物的生长 2、重量法

以干重、湿重直接衡量微生物群体的生物量；

通过样品中蛋白质、核酸含量的测定间接推算 微生物群体的生物量；

测定多细胞及丝状真菌生长情况的有效方法