曲霉菌株的保藏与复壮

第9期 2007年9月

中国调味品

CHINACONDIMENT

No.9Sep.2007

曲霉菌株的保藏与复壮

柏芳青

(滨州职业学院,山东滨州 256603)

摘要:对在发酵制曲生产中曲霉试管菌株的作用及效能作了客观分析,并对妥善保藏试管菌株,及对退化菌种进行分离复壮等保持试管菌株优良性能的方法作了详细叙述和介绍。关键词:曲霉;菌株;保藏;复壮

中图分类号:TS201 57 文献标识码:B 文章编号:1000 9973(2007)09 0023 03

Thepreservationandrecoveryofmildew

BAIFang qing

(BinzhouVocationalCollege,Binzhou256603,China)

Abstract:Thisarticlegivesanobjectiveanalysisonthefunctionandefficacyofthetesttubemildew.Whichareproducedintheprocessofzymosis.Italsoelaboratesthemothoelsofhowtokeeptheeminentfunctionofthetesttubefungus,suchas,themethodofcoppingwithpreservingthetesttubemildewandseparatingandremovingthedegenerativemildew.Keyword:mildew;germ;preservation;recovery 曲霉菌广泛存在于自然界的谷物、空气、土壤及各种有机物质上,是重要的生产菌类,工业上采取曲霉生产酒类、酱油、食醋、酱类、酶制剂及有机酸等。比如,在发酵工业生产中,米曲霉用于酱油及酱类制曲及发酵生产,黑曲霉及甘薯曲霉在制酒和食醋生产中用于麸曲生产,同时大量用于酶制剂生产,是具有强大生命力的菌株。但也存在一些其他曲霉菌类,比如黄曲霉、毛霉、根霉等,他们在制曲生产中作为杂菌,消耗原料养分,降低生产效率,分泌有害物质,影响纯种发酵,成为有害菌。同时,曲霉菌和其他微生物一样,具有基因变异性,随着时间、环境、条件变化,菌株性能退化,生长势下降,生长繁殖能力降低,有的感染杂菌,给生产造成严重危害。所以,在生产中选育、使用优良的菌种至关重要,它关系到提高发酵产品的产量和质量。实践经验告诉我们,要保证菌种生产的高质量和稳定性,首先要保证有一个高质量的试管菌株。俗话说:没有好种长不出好苗。使用优质的种子,才能保证下面的生产有一个顺利的过程,否则,你本身提供的就是一个劣质种

收稿日期:2007-04-08

子,经过几代繁殖扩育,只能是把低劣的质量越扩越大,最后得到一批低质量的菌种。所以在生产中,保证试管菌种的优质高效至关重要。下面,笔者就怎样保持所使用曲霉试管菌株的优质高效谈一点自己的看法。

1 试管原菌的取得

曲霉试管原菌的取得一般是在土壤、水、空气、植物的根、茎、叶、花、果以及动植物的残骸中,通过筛选、增殖培养、分离培育取得。经选育的菌种,酶系纯正,性能稳定,具有酶活力高、生产周期短、培养基简单、管理方便,制出产品产率高、风味好等优点。目前,试管菌种的选育工作大多由国家或地方科研机构进行,因设备及人才原因,大多数厂家尚无能力去进行开发。所用试管原菌由科研机构或其他厂家提供。厂家所作的工作就是在移接和保管试管菌时,保持原菌性能,向大生产提供优良菌株。

2 试管菌种的移接与保管

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中国调味品总第343期

2.1 试管菌株培养基

培养基的成分和配比,对微生物的生长发育、物质代谢、发酵产物的积累及生产工艺的确定,均有很大影响。良好的培养基可充分发挥菌株的生理特性,达到良好的生产效果。相反,若培养基成分、配比或营养物不当,则菌株效能再好,也不能发挥出来。因此,在发酵工业生产中,除了选用优良菌株外,必须重视培养基的制备。经过长期生产实践和不断改进,目前使用下列培养基作为曲霉菌使用培养基。

2.1.1 培养沪酿3.042米曲霉

豆汁1000mL;硫酸镁0.5g;可溶性淀粉20g;磷酸二氢钾1g;硫酸铵0.5g;琼脂20g;pH值6.0左右。

豆汁制备:豆粕(或豆饼)加水5倍煮沸(小火)1h,边煮边搅拌,然后过滤。每100g豆粕(或豆饼)可制成5 B 豆汁100mL。2.1.2 培养3.324甘薯曲霉

6 B 饴糖液,100mL;琼脂2%,2~3g;pH6.0左右,6.0。

2.1.3 适用于大多数曲霉菌生长的培养基

察氏培养基:

NaNO33g;KCl0.5g;FeSO40.01g;K2HPO41g;MgSO4 7H2O0.5g;蔗糖20g;琼脂20g;蒸馏水1000mL;pH6.7。

米曲汁培养基:

5~6 B 米曲汁100mL;琼脂2g;pH值6.0。2.2 培养基的配制

配料!溶解!校正pH值!加琼脂溶化!过滤分装!塞棉塞、包扎、标注!灭菌。

按照培养基配方,称取各种材料和药品,依次加入水中溶解,调整pH值,将琼脂加入溶液中,加热熔解。趁热分装试管,装量在大约1/4~1/5处,塞好棉塞,棉塞外用防潮纸或牛皮纸捆扎,并标注。置于灭菌锅中,1kg/cm2压力灭菌30min,取出置于无菌室中斜躺摆放,待培养基冷却凝固后成试管培养基斜面。将试管培养基置于30~32 培养箱中培养3~4d,观察无杂菌生长,取出放入冰箱中保存待用。但存放时间不宜过长,一般不超过一个月。

2.3 试管菌种移接

的无菌状态,严格使用工具的消毒灭菌,按照移接规程,将试管口接近酒精灯火焰,移接要迅速,严防杂菌感染。

接种前要贴上标签,标签贴在距试管口约3cm处,注意不要盖住棉塞,也不能阻挡观察斜面菌长势视线。注明接种的菌名、日期、接种人姓名。这一点很重要,它是菌株有效管理的重要一环。某公司曾出现过只在试管菌株上标注简单的某月某日情况,结果不知是哪一年的某月某日,误拿已严重退化的菌株用于大生产,造成混乱,影响生产。

接种后置于30 左右恒温箱中培养3d,待菌株全部发育繁殖,孢子成熟后,取出放入 …… 此处隐藏：2519字，全部文档内容请下载后查看。喜欢就下载吧 ……