海藻酸钠固定化β-葡萄糖苷酶的制备及其性质研

时间：2025-04-26

海藻酸钠固定化β-葡萄糖苷酶的制备及其性质研究

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第3 0卷第 1 0期20 0 7年 1 0月

合肥工业大学学报 (自然科学版)J OURNAL 0F HEF EIUNI VERSI 0F TECHNOLOGY TY

Vo. 0 No 1 13 . 0Oc . 2 0 t 07

海藻酸钠固定化』葡萄糖苷酶的制备及其性质研究 3一潘利华，罗建平，查学强，王贵娟，李想 (合肥工业大学生物与食品工程学院，安徽合肥 200) 3 0 9

摘

要：在活性炭、明胶等 8种固定化载体筛选的基础上研究了以海藻酸钠为载体，二醛为交联剂固定化戊

葡萄糖苷酶的条件，对固定化酶的酶学性质及其在催化制备大豆异黄酮活性苷元染料木素中的应用进行并了研究。B葡萄糖苷酶在 0 2戊二醛溶液中交联 2h后再与 2/ _ .0 0g L海藻酸钠混合，后逐滴加到 4g L然/ C C2 a1溶液中，固化 1h后过滤、洗涤得固定化葡萄糖苷酶，固定化酶的酶活回收率为 8. 7。固定化酶的 3 6最适温度、热稳定性、 H值稳定性以及与底物的亲和力都有所提高，适 p值基本不变。该固定化酶重复 p最 H使用 6次后其活力仍保持 9 . 4, o 9 染料木苷转化率达 6 .2。 o o 关键词：_ B葡萄糖苷酶；海藻酸钠；固定化酶；染料木素中图分类号： TQ9 5 2文献标识码： A文章编号：03- 6 (07 l一3 10 1 0一0 0 2 0 )O13—5 5

P eaai n rpri f o i agn t i rp rt nadpo et s du liae mmo izd[g cs ae o e o s m - bl e I l oi s i -u dP i u, L i - ig Z AN L— a UO J npn, HA eqa g WANG Gu- a, L a g h a Xu -i, n iu n j I n Xi( c o 1 fBit c n lg n oo gn eig,H ee ie st fTe h oo y,Hee 3 0,Chn ) S h o o e h oo y a d F d En ie rn o fiUn v riyo c n ig fi2 0 09 ia

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guaad h d,s b e u n￣n t .% sdu a iaes lt n h n a dn h ba e ltrle y e u sq e tmi g wi 2 0 h o im l n t oui,t e d ig t eo ti d g o nm i t r r p s n o t e 0 4 Ca 2 o u in a d s l i c tn o n o r Th r p r is o h x u e d o wie i t h . 0 C1 s l t n o i f a i g f ro e h u . o d i e p o e te ft e

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葡萄糖苷酶 ( C .. . 1, E 32 12 )又称[I葡萄}) __糖苷葡萄糖水解酶，能够水解结合于末端非还它

生产的关键酶。此外，_萄糖苷酶对植物防御[葡}害虫具有积极作用，而应用 f葡萄糖苷酶的转糖} _

原性的 p )—_ I葡萄糖苷键，同时释放出 I葡萄糖 ) _和相应的配基。葡萄糖苷酶是纤维素酶系中的一

个组成部分，在纤维素降解中发挥重要作用。

苷作用生产非离子表面活性剂具有广阔的应用前景。但是 G葡萄糖苷酶市场价格昂贵、用寿命使和储存期短，因而在实际应用过程中受到一定的限制。

在食品i业中，葡萄糖苷酶为食品风味酶可用于果汁、果酒及茶的增香，并且是天然色素枝子蓝

葡萄糖苷酶作为生物催化剂用于工业化生

收稿日期：0 61— 9修改日期：0 61—6 2 0—00; 2 0—02基金项目：安徽省自然科学基金资助项目(5 4 0 0 )合肥工业大学科学发展基金资助项目( 50 1 ) 00131; 030F作者简介：潘利华 (9 3,,黎川人， 1 7一)女江西合肥工业大学讲师；罗建平 (9 6,, 1 6一)男安徽合肥人，合肥工业大学教授，博士生导师.

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合肥工业大学学报 (自然科学版 )

第3 O卷

产将依赖于酶的固定化。随着固定化酶技术的发

溶液中，固化 1h后取出， p值为 5 0醋酸缓用 H .冲溶液冲洗 3次，制得直径约 3mm的固定化酶。每个试验重复 3,平均值。固定化酶于 4℃次取

展，固定化载体种类越来越多，已报道作为固定化 f葡萄糖苷酶的载体有葡聚糖，丝素蛋白【,} -蚕 2] DuleA 5 8树脂 _, H值两性载体 E da i oi -6 t 3p] u rgtS 1 0铂纳米碳管[。葡聚糖固定化 J葡萄糖 -0 E和 5] 3一

冰箱甘油中保存备用，用前用 p值为 50醋

使 H .酸缓冲溶液冲洗 3次。1 3大豆异黄酮活性苷元染料木素的制备 . 0 1mg mI染料木苷 ( ./ 甲醇配制 ) . 0 5mL溶

苷酶酶活力回收较低，到 7;素膜因载体不 O丝膜的屏障作用而使固定化酶与底物的亲和力降低； D oi 5 8 E d a iS 1 0以及纳米碳而 u leA-6、 u rgt r 0 t

液与 p值为 50醋酸缓冲溶液 15mL混匀， H . .然后加入 0 5g固定化酶， 5 C下反应 3 n后加 . 4 0mi