第１期

杨芬。等：高效液相色谱法测定牛组织中雷复尼特的残留量

７ｌ

２．４样品处理

称取牛组织样品（肌肉、肝、肾）各１０９，加入

乙腈２０ｍＬ，在１００００ｒ／ｍｉｎ下均质１ＩＩｌｉｎ制备匀浆。匀浆在４０００ｒ／越ｎ下离心５ｍｉｎ，沉淀物再加入１０

ｍＬ乙腈提取一次，合并提取液。通过乙腈预淋的层析柱（层析柱为１００×ｌＯｍｍ具塞玻璃柱，由下至上依次为：少许玻璃棉＋３ｃｍ中性氧化铝柱）。再用５ｍＬ乙腈淋洗柱子，滤液收集于磨口烧瓶中。加入正

丙醇５ｍＬ，于４０℃水浴上旋转蒸发至于．以流动相

ｌ

ｍＬ溶解。备用。３结果与讨论

３．１色谱条件的选择

参照相关文献，采用乙腈＿ｐＨ２．５的水（８３：１７，

ｔ，：秽）为流动相，流速为１．５ｍＩ．／ｍｉｎｃ５＇６】，在实验条件

下。雷复尼特可与组织中内源性物质较好的分离且保留时间适当，雷复尼特保留时间为１２．８０ｍｉｎ（如图

ｌ，２）。对流出的峰进行紫外扫描。发现雷复尼特的

紫外最大吸收峰在２８２姗处．为此应用二极管阵列检测器，选择２８２姗处检测雷复尼特，提高了检测

灵敏度。

脚ｌ（孺舢ｔｏｇ瑚ｍ

豳１

■复尼特标样色谱圈１１旧／ｎ１Ｌ）

ｏｆ

ｔｈｅ憎如鞠ｎ№鳓童堪ｋｒｄ（１●ｌｇ／ｍＩ．）

眦锄蛐卿０ｆ岫溅洲蛐ｍ岫（０．０ｌ毗）

圈２■复尼特肌肉样品色谱田（０．０１旧／ｇＩ

３．２净化条件的选择

在样品净化处理条件的选择中．分别采用了液液萃取法、Ｃ螗柱法、氟罗里硅土柱法及中性氧化铝柱法，结果发现，经中性氧化铝柱净化处理后的样品回收率高且杂质少，因此采用中性氧化铝柱法。

３．３方法的线性相关性

将储备溶液用流动相稀释成浓度分别为Ｏ．０５、０．２、０．５、１．０、２．０、４．ｏ灿ｇ／ｈＩＬ的标准溶液，进样体积２０斗Ｌ，以峰面积为纵坐标，样品浓度为横坐标，计算回归方程，得Ｙ＝１０．８ｌｌＸ＋０．１０２

ｌ。ｒ＝０．９９９９，

可见，在０．０５￣４．Ｏ斗咖Ｌ范围内，线性关系良好。

３．４方法的提取回收率

向牛空白组织（肌肉、肝、肾）中添加雷复尼特标样溶液，配制成组织浓度分别为０．０ｌ、０．１、０．４

斗ｇ／ｇ３个浓度的样品，按“样品处理”项下处理后进

样。与直接将对应浓度的标准品进样所得的峰面积相比，计算样品的提取回收率。每一浓度进行７样本分析．结果３个浓度下肌肉组织中样品的提取回收率分

别平均为７８．３％，８５．８％和９５．１％；肝组织中样品的

提取回收率分别平均为７３．３％，８３．９％和９１．９％；肾组织中样品的提取回收率分别平均为７４．３％。８１．９％

和９２．８％。

３．５方法的准确度及精密度

向牛空白组织（肌肉、肝、肾）中添加雷复尼特

标样溶液，配制成组织浓度分别为０．０ｌ、０．１、０．４ｐｇ／ｇ

的３个浓度的样品．按“样品处理”项下处理。连续

测定３ｄ。根据标准曲线，计算样品的测得浓度，与配

制浓度对照。求得组织样品测定方法的准确度与精密度，结果见表ｌ。试验数据表明，生物样本的分析方法符合有关规范要求。

裹１■复尼特测定方法准确度与精密度

Ｔ曲Ｉｅ１Ａ∞ｕｎｃｙ

ａｎｄ

ｐｒｅｃｉ硝０ｎ如ｒ

ｔｈｅ舢Ｉａｌｙ豳ｏｆｎ如ｎｎＩｄｅ

４结论

关于雷复尼特在组织中残留量的测定。国内文献

报道较少，笔者采用乙腈一ｐＨ２．５的水（８３：１７，移：ｔ，）

为流动相．使雷复尼特与组织中内源性杂质得到很好的分离，保留时间合适。峰形较佳。样品净化处理采用中性氧化铝柱法．样品回收率高且杂质少。该方法快速、简便、准确、灵敏．可用于牛组织中雷复尼特

７２

精细化工中间体第３８卷

残留量的测定。参考文献：

何宏轩，张西臣，程远国，等．碘醚柳胺的研究现状［Ｊ】．中国兽医杂志，１９９９，２５（６）：５３一“．［２】

孙涛，李西汉．高效液相色谱法测定碘醚柳胺的含量［Ｊ］．中国兽药杂志．１∞８，３２（３）：２．［３】

ＭＢｌ蚰ｃ瑚ａｗ防ｗＪ，ｋ釉ｅｄｙＤＧ，Ｔａｙｌｏ

ｍｌ叔柚ｉｄｅ

ｉＩｌ

Ｓ

Ｍ．Ｄｔ炯ｃｍｉＩ埘ｉ帆０ｆ

ｐｌａⅢａ岫ｉｌｌｇ

ｉｎ

ｈｉ曲ｐｅ血姗ｒ啪ｌｉｑＩＩｉｄ

ＨＰＬｃｍｅ姗ｏｓｐ忸ｙ

ｃｈ哪叫喀砷ｈｙ，

０ｆ“ｑｌｌｉｄ

ｃｈ咖Ｉ眦。即日ｐｈｙ（ＨＰ【ｃ）蛐ｄ

１９帅。１３：ｌ５９５－ｌ６０９．

ｔｉ髓ｕｅ岫ｉＩｌｇ

ｎ啪ｓ。ｐ∞ｔ瑚ｌｅｔｒｙ［Ｊ］．Ｊ叫ｒＩｌ矗ｌ

Ⅲ

ｓｔ０州Ｇ．Ｄｅｔ刹ｎａｌｉ∞。ｆ

ｔｉｓｓｕ髓ｂｙ

１９％．７ｌＯ：２３４—２３８．

ｃｌ憾帅ｔｅｔ嘲ｉｄｕ伪ｉｎ

０ｆ

ｐＩ枷蛐ｄ

Ｂ，

｝

ｈｉｇＩｌ—ｐｅ面咖胂∞ｌｉｑＩＩｉｄ

ｃｈ删瑚ｔ咿ｐ …… 此处隐藏：2048字，全部文档内容请下载后查看。喜欢就下载吧 ……