蕙兰的无菌播种及根状茎培养技术研究(3)
发布时间:2021-06-05
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试验结果表明,授粉后种子能否萌发与果实成熟度密切相关。授粉后60d的果实,种子的胚发育不成熟,萌发率低;授粉后240d的果实,可能积累了过多的生长抑制物,萌发率也有所降低。以采收授粉后120d的蒴果,进行无菌播种,种子的萌发率最高。
(二)NaOH溶液预处理对种子萌发的影响
取一枚发育良好的未开裂蒴果,消毒后将其纵切,将种子分为4份,其中一份直接播种于前述培养基中,其余三份分别经0.1mol·L-1NaOH溶液处理10、20、30min后,用无菌水冲洗后再播种于相同培养基中。90d后统计各组的萌发率并重复三次,结果如下表2所示。
表3-2 NaOH溶液预处理与种子萌发率统计表
由上表不难看出,0.1mol·L-1NaO
H溶液浸泡处理对提高蕙兰种子萌发率的作用并不明显。
(三)培养基类型和植物生长调节剂浓度配比对根状茎增殖的影响
种子在培养基上吸水膨胀,不久胚细胞开始分裂,种胚增大,60~80d后陆续萌发,形成原球茎。原球茎不久即伸长形成根状茎,根状茎的生长具有极性,以合轴的方式进行分枝,先端可发育成芽。根状茎的表面有许多瘤状突起,表皮细胞伸长形成白色的吸收毛,可能与吸收水分和营养有关。旺盛生长的根状茎呈深绿色。
为避免其他因素的干扰,试验前先把发育良好的根状茎转入不添加植物生长调节剂的MS培养基中,连续继代培养4次。再将新增殖的根状茎分别转入述的9组培养基中,60d后统计根状茎增殖的倍数,结果见下表3。
表3-3 根状茎增殖倍数统计表
以上的结果表明:蕙兰根状茎增殖的最佳培养基的配方为MS+NAA0.5mg/L+BA0.5mg/L+蔗糖30g/L+
琼脂6g/L或B5+NAA0.5
Mg/L+BA1.0mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6g/L。
培养60d后,根状茎的增殖倍数分别可达2.56和2.74。
四、讨论
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