高水解度草鱼鱼鳞胶原蛋白肽的研究

时间:2025-04-23

第 3卷第 2期 6 2 01 1年 3月

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V oI . . O. 36 N 2 M ar2O11 .

高水解度草鱼鱼鳞胶原蛋白肽的研究周光朝,良忠,刘万菡,李丁宁,汪海波(武汉工业学院食品科学与工程学院,湖北武汉 4 02 ) 3 0 3[要】摘在单因素试验基础上进行中心复合组合设计试验,立了对水解度影响较大的 3个因素间的数学模型。 _高水建得出

解度胶原蛋白肽制备的最佳工艺参数:酶解温度 5 . p .、 1 8℃、H95酶解时间 3h此条件下鱼鳞酶解水解率可达 2 .%。经, 02 0离子交换树脂脱盐和 MW 0 0U超滤膜超滤后,滤液组分占鱼鳞胶原多肽含量的 8 .%。三氯乙酸可溶性氮百分含量 30 62 3

(C— S ) 9 .%,分含量为 1%。 T A N I为 11灰 2 . 1

【关键词】草鱼鱼鳞;解;酶中心复合设计;原蛋白胶

据统计,0 7年中国水产品总量为 4 4 - t其中 20 7 75万 .内陆水产品达 2166万 t内陆鱼类产品总量为 1 0 . 9 ., 88 9 4

滤试验装置 ( L O 3型 30 0U中空纤维超滤膜 )京旭 C W- 0 0:

邦膜设备有限责任公司。13实验方法 .

万 t,中每年废弃的淡水鱼鱼鳞超过 3 t其” 0万 t。中国淡 E水鱼加工企业的规模较小且分散,鱼鳞研发滞后导致没有很好的开发利用,成了巨大的资源浪费。造 鱼鳞中含有丰富的胶原蛋白[, 3胶原蛋白经酶作用后, 1 再经过特殊处理得到的胶原蛋白多肽 .是由许多分子链长度不等的低分子小肽混合组成的。胶原蛋白肽因其具有良好的乳化性、胶凝性、成膜性和增稠性等功能特性及特殊的生理活性]已广泛应用于食品、疗、健及美 ,医保

1 .鱼鳞胶原蛋白水解液水解度 ( .1 3 HD)测定 I的 ]

采用双指示剂甲醛滴定法测定反应过程中水解液的水解度。 1 .高水解度鱼鳞胶原蛋白肽的制备工艺流程 -2 3

鱼鳞清洗一干燥、碎一浸酸脱钙 ( .mo LH 1一粉 0 l C ) 4/水洗至中性、滤一浸碱除杂 (.5m l O一水洗至过 01 o LNa H)/中性、过滤一酶解一灭酶一离心分离

一上清液一离子交换脱盐一超滤一真空浓缩一冷冻干燥一高水解度鱼鳞胶原蛋白肽。

容等行业“。本实验利用单因素及中心复合响应面设计]试验 .究高水解度胶原蛋白肽制备的最佳工艺条件,研以

期为后续胶原蛋白多肽的生理活性研究提供科学依据。

1 .单因素实验 .3 3

l材料和方法11材料与试剂 .

酶水解一般以酶的选择、物、底反应温度、H值等为 p因素进行研究。将鱼鳞经预处理后按 11:0比例溶解,浴水加热一定温度。定不同的酶 (瓜蛋白酶、 s. 8中性测木 A1 9 3蛋白酶、性蛋白酶 )不同加酶量 (%、%、%、%、% )碱、 1 3 5 7 9、 p值 ( .、 .、 .、00、 1 )酶解温度 (0 4、0 5、 H 70 80 90 1 . 1 .、 O 4、5 5、5

草鱼鱼鳞:湖北德炎水产有限公司(白质 6 .0 蛋 31%,水分 1 .9:0 x 29%)O 1 8型阳离子和 2 1 4型阴离子交换树 0x脂:上海树脂厂。木瓜蛋白酶(aan、 P p i)碱性蛋白酶 (laae、 A c l ) s中性蛋白酶 ( e t s ) N ur e:南宁庞博生物技术责任有限公 a司:酸:盐天津化学试剂有限公司;氢氧化钠:天津南开化工厂;三氯乙酸( C分析纯 )北京化工技术有限公司。 T A,:12仪器与设备 .

6 0℃)酶解时间 ( .、、.、、. )条件对鱼鳞胶原蛋、 1 2 25 3 35h等 5白水解率的影响。13 I. 4中心复合试验设计

根据单因素试验的结果,以影响鱼鳞胶原蛋白水解率的酶解温度 ( )p X。、H值 ( ) 及酶解时间 (,为 3个试 X)验因子 .以鱼鳞胶原蛋白的水解率 ( )指标,三因素 y为做中心复合响应面设计,共计 2 3个试验点,确定鱼鳞胶来原蛋白水解的最优工艺条件。表 1鱼鳞胶原蛋白水解三因素二次中心复合设计

T L 5台式低速离心机: D一A上海菲恰尔分析仪器有限公司: F 1显集热式磁力搅拌器:州国华电器有限 D一数常

公司: H一 5 H计: P S 2p上海精密科学仪器有限公司;D 8 F一冷冻干燥机:北京博医康实验仪器有限公司; M一 2 L 15超收稿日期:

0 lO一 l 2 l— 3 O基金项目:国家自然科学基金,目编号:17 16②湖北①项 2066;省教育厅高校产学研合作资助项目,项目编号:

c 00 4;武汉工业学院研究生教育创新计划资 2 10 0③助 .目编号: 8 x 1。项 0 c0 0

作者简介:周光朝,,男硕士研究生,研究方向为食品新资源开发与利用。

通信作者:良忠,,刘男博士,教授,研究方向为食品新资源开发与利用。 5 2

14数据处理 .

采用 Mii b软件进行分析。 nt a

周光朝等:水解度草鱼鱼鳞胶原蛋白肽的研究高

第 3 6卷 2 01 1年第 2期

21 ._酶解温度对蛋白水解率的影响 3

2结果与分析2 1单因素试验结果 .2 11酶的筛选 . .

选取 A cls laae酶,加酶量为 5,H 90的条件下水在% p .解 30h.察酶解温度对蛋白水解率的影响。结果如图 3 .考 所示 .于 5 H,着温度的升高,解率增加越快。低 0o,随 c ̄水超过5 0℃后,解率缓慢下降,因可能是高温使酶的蛋白水原

木瓜蛋白酶、性蛋白酶、 1 9碱 As3 8中性蛋白酶水解鱼 .鳞胶原蛋白,解条件均按照蛋白酶说明书中推荐的最水适条件进行,体水解条件如表 2具。表 2实验所用酶及水解条件

质结构发生改变 .导致酶活性降低。2 01 8

1 6l 4 1 2

1 08

水解过程中维持反应溶液的 p值和温度恒定, H自反应开始每问隔 1 h取 1次样,灭酶后水解液冷却至室温, 测 H不同酶制剂对鱼鳞胶原蛋白水解率的影响见同 I D。。1I

64 2

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