食品中农药残留免疫检测技术的研究进展
时间:2025-07-11
时间:2025-07-11
第$期
$##)年B月
第)卷
中国食品学报
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食品中农药残留免疫检测技术的研究进展
郑晓冬
何
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杭州!"##$%)
(浙江大学生物系统工程与食品科学学院
摘要—免疫检测食品中农药残留的危害已引起世界各国人民的关注。本文介绍了农药残留新型检测方法——
—抗原合成的基本方法、免疫途径和抗体获得的种类以及技术的基本原理、农药残留免疫检测中关键步骤——最新的农药残留免疫检测技术等。关键词文章编号
食品
农药残留
免疫检测
进展
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随着农业生产的工业化,农药已经成为现代农业生产中不可分割的一部分,它们被广泛应用于农业生产。然而,这些农药对人或野生动物有毒害作用甚至会导致死亡,并可能对生物链造成极大的破坏,增加害虫的抗药性。农药残留在自然环境中,污染土壤和饮用水,并引起食品中农药残留污染,导致健康问题。人类食用被农药污染的食品后,残留的农药会贮存在体内,很难排泄,最终造成人类急性或慢性中毒。农药对人类的毒性作用除表现在影响人体中各种生理活性酶的功能外,还对其它系统机能构成潜在的危害,甚至会降低机体的免疫功能,表现出“三致”作用(致癌、致畸、致突变)。目前,世界各国政府都认识到了农药残留的危害,并开始制定农药的最大残留量来限制和规范农药的使用。这就需要有相应的检测技术与之相匹配。
常规的农药残留检测技术主要有薄层层析(*+,)、高效液相色谱(-.+,)、气相色谱(/,)、气质联用(/,012)等方法3"4!5。由于这些方法需要昂贵的仪器设备,复杂的前处理,熟练的技术人员及较长的分析周期,而且只能用于单个样本的检测。因此,人们迫切需要一种简单、快速及廉价的检测技术。
免疫分析方法是67889:和;<=>9?于"%@(年
引入化学分析界的。农药的免疫分析法最早是由
,<?A<?9等于"%B(年第"次将放射免疫分析
(=9CD9DEEF?97>>7G,HIJ)应用于KK*和马拉硫
磷的检测,这标志着免疫学检测技术正式应用于农药残留检测中。L=M<N9ODMP于"%’"年提出的关于农药KK*、马拉硫磷和氨三唑的免疫分析法,显示了免疫分析法在农药残留分析中的巨大前景。"%(#年,-7EE9MQ和1FEE7关于农药半抗原与蛋白质的连接方法和抗体制备的综述性文章,大大地推动了农药免疫分析法的进展3)5。我国对农药的免疫分析最早是由RF?NS,黄葵3@5提出的。免疫分析方法因为具有操作简单、前处理简化、灵敏、特异性强、检测快速、不需要昂贵的仪器等优点脱颖而出,近年来愈来愈受到重视,成为现代农药残留的重要检测技术。
!农药残留免疫检测的原理
免疫分析法是临床免疫学在分析化学领域的
延伸。它的主要原理是将需要分析的物质制备成抗原,然后免疫动物,使之产生抗血清,再利用抗原与抗体的特异性反应,结合现代测试手段来对被测组分进行定性以及超微量定量分析。
农药是小分子量物质(分子量T$@##),属于半抗原,一般不具备免疫原性,即不能刺激动物产生免疫反应,但具有与相应抗体在体外发生吸附反应的能力,即有反应原性。将农药小分子通过一定碳链长度的连接分子与大分子量的载体
收稿日期:$##!&#"&$%
作者简介:郑晓冬,女,"%@B年出生,教授
第!卷第"期食品中农药残留免疫检测技术的研究进展
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(一般为蛋白质)以共价键相偶联制备成人工抗原,以人工抗原免疫动物,使动物的免疫系统发生应答反应,产生特异性。针对影响食品安全性物质———如农药的活性物质免疫球蛋白或称抗体来识别该农药分子并与之结合。这种结合反应不仅可在体内进行,也可在体外进行,符合质量作用定律,这是免疫分析的基础#$%。
!农药抗原的合成
若要进行农药残留的免疫分析,首先要将农
药分子与大分子蛋白质连接起来,以增大其分子量,使其具有免疫活性。目前,农药分子与蛋白质的常用连接方法根据所含活性基团的不同有以下几种:
第&种:含有羧基的农药分子。这些农药分子可利用羧基通过碳二亚胺法、活泼酯法、混合酸酐法等方法与载体蛋白质分子上的氨基形成酰胺键,从而实现偶联。这些方法各有特点,对于同一个农药分子可以采用不同的偶联方法。
’()*(+*,()等用混合酸酐法合成了的免疫抗原#-%。
单国民等利用甲萘威酯法合成了活泼甲萘威的免疫抗原#.%。/0120*2/3(4等利用活泼性酯法合成了三氮苯类除草剂的免疫原#.%。徐勤惠等用碳二亚胺法合成了苯甲托品的免疫抗原#&5%。他们或者用不同的方法合成同一物质的免疫抗原,或者用同一方法合成不同物质的免疫抗原,结果都取得高的抗体效价。
第"种:含有氨基的农药分子。一般采用重氮化法,在低温条件下使含有苯胺的农药分子与亚硝酸反应形成重氮盐,然后与载体蛋白分子上的酪氨酸或组氨酸残基反应,形成以偶氮键交联
的免疫抗原#&&,&"%
。脂肪胺类农药分子可在水溶性
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