优良醋酸菌的分离筛选

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19 9 4年第 4期

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,优良醋酸菌的分离筛选尸张彩丁52 2. _6 4.7 -———— _——

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摘要

A天然发酵醋醅中分离到 1 9醋酸菌 .中筛选出 3株产酸快、精转酸率高的菌 J, 8株从酒

株其中 F一茵株在 0 0 . 9乙醇时产酸量在 6 d达到高峰 .酵液产酸量这 5 . g L(发 3 5/不合葡萄糖 )和 7 . g L( 1《萄糖 ) 69/含

关词璧！咝 键：旦 旦I o a i n a l c i n o up r Ac t a t r s l to nd Se e t o f S e e ob c eZhang Ca i

Ab t a t 1 9 s r i s a e io a e r m o i a u a e me t d v n g r,a d 3 s r i s a e s一 sr c: 8 t a n r s l t d f o s l n t r lf r n e i e a d n tan r e] c e r m h m o h i m o e q i k y a i o mi g a i t n i h a c h lc a e i c d t a s a e t d fo t e f rt er r u c l c d f r n b l y a d h g l o o i c tc a i r n l— i to a e I h t an h t a n Fb r a h s t e h gh s o n f￣ e i a i m o n tt e 6 h i n r t n t e 3 s r i s t e s r i一 e c e h i e tp i to c t cd a c u ta h t

d y i h e me tn r t t h lo o i c n e ta in o . 9 h il fa e i a i en a nt ef r n ig b o h wi t ea c h l o c n r t f0 0,t e yed o c tc cd b ig h c o

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Ke r s: e o a t r i o a i n s l c i n y wo d Ac t r ce s l to e e to

食醋的酿造大

体上可分为表面发酵法和椿层发酵法口。这两种发酵方法主要都是依靠]醋酸菌的活动将乙醇氧化为乙酸即醋酸。国外对醋酸菌优质菌株的选育和醋酸发酵机理的研究非常重视，了大量工作。国内对醋酸菌优良菌种的应用也日益重视起来，积累了不做并

少有关醋酸菌分类鉴定及性能研究的资料。目前我国应用于液体醋生产的醋酸菌有：1AS () l 4一恶臭醋酸杆菌混浊变种 ( e bce a cs,遍应用于酿醋生产。最适培养温度 _ 1; Act at rne)普 o r2~ 3℃,适 p值 3 5 6 0耐乙醇能力< o 0,高产酸量 7~ 9 g L,进一步将醋 8 o最 H .~ ., .8最 O 0/能酸氧化为 C和水 ( L化反应 ) 2沪酿 l0口：旺醋酸杆菌 ( eoa tr oa i s) 02 F氧。() _ 1]罗 Actbce lv ne e, n

是上海醋厂从丹东速酿醋中分离到的一株优良醋酸菌，也是我国酿醋行业普遍使用的菌种。 () 3沪酿 1 0 9是 1 8 .7一： 4年从上海醋厂老法发酵醋酷中分离到的一个新菌株。在 0 1乙醇 9 .时产酸达到 6 . g L, 3 6/而且耐乙醇能力达到 0 1 . 7乙醇时仍能产酸。 醋酸菌是专性好氧细菌，氧化乙醇为乙酸的作用是由于它的细胞膜上含有高活性的其乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶复合体“。醋酸菌要在含有较高醋酸的环境中增殖井维持其细胞]

内环境稳定，就需要获得大量能量 ( P 0。 AT )因此在分离醋酸菌时必须考虑到在分离过程中

收稿日期：9 3 1一 O 19 2 9

优良醋酸菌的分离筛选

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第 4期

要保持醋酸菌所处环境的稳定和充足的氧气供应。我们采用向培养基中添加乙醇和醋酸的方法，功地分离到了产酸快、酸率高的菌株。成产

1材料和方法1 1材料 .1 1 1分离样品 ..

天津市调料三厂太池发酵醋醅，津市调料五厂太池发酵醋醅和浙醋醋醅。天1 1 2对照菌株 ..沪酿 1O。 . 1

1 1 3培养基 ..

1 1 3 1基础培养基 . ..00 . 3无水乙醇。

1酵母膏，葡萄糖，H .。×1‘a灭菌 3

mi。使用前加入 1 p 45 5 0 P 0 n

1 1 3 2产酸试验培养基 1基础培养基临用前加入 0 0 ..., . 7无水乙醇，分装于 5 0 0 mL三角瓶 .瓶 5 mL;,母膏 1,H4 5使用前按需要量加入无水乙醇，装于 5 0每 0 2酵 p .,分 0 mL三角瓶，瓶 7mL。以上培养基用冰乙酸调 p值。每 0 H

1 1 3 3分离和斜面保藏培养基 .. .12醋酸菌分离流程 .

10 0mL基础培养基中加入 2琼脂， 灭菌后加入 0 5 .

无菌 C C和 0 0水乙醇 -分离培养基。装试管，菌后摆成斜面即为保藏培养基。 a Os . 3无为分灭

样品一增殖培养一稀释分离一纯化一斜面保藏一产醋酸定性试验一初筛一复筛 ( ) 1一初步鉴定一复筛 ()保藏菌株 2一1 2 分离 . .1

称取 1g样品，入盛有 5 mL基础培养基的 2 0 0放 0 5 mL三角瓶中，O 3℃振荡培养，床偏摇

心距 2 5m, .c转速 1 0/ i。2￣4h后，出增殖液进行分离。将增殖液用基础培养基稀 2 rr n 4 8 a取释到 1度 各浓度稀释液 0 2 O浓取 . mL,别用倾注法和涂布法接种子分离培养基平板上。分 3￣培养 4￣7 h后， 0 C 8 2挑取透明圈太，菌落丰厚 .缘整齐的单菌落进行纯化。边将纯化后的菌株接种于斜面保藏培养基，O 3℃培养 4 h后保藏于 4 8℃冰箱。1 22 ..产醋酸定 试验： I生

将上述斜面菌种接种于含 0 0 . 3乙醇，酵母膏，.%c co 1 1 5 a的培养液中，0C静置 3'浅层培养 3 5~ d后， 5取 mL除去菌体的培养液， 2 5 lL Na以 . mo/ OH溶液中和至 p ., H7 O加入 5 F C。液 5 6滴，成红褐色沉淀者为产醋酸细菌。 e 1溶~形1 2 3初筛 ..

将上述产醋酸细菌接种于 1酸试验培养基，株一瓶， 3℃静置培养 5产每于 O d后滴定酸度并比较之。 产酸量的测定： 2取 mL发酵液，入 5 mL蒸馏水，~ 5滴 0 5酚酞酒精溶液，加 0 3 .用

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标定的 0 1 o/ a . m lL N OH溶液滴定至浅粉色。由耗用的 Na OH溶液的体积计算样品中的含酸量

(以醋酸计 )。产酸量 (/一 ( g L) V—V。×c H 0 L )№0×6/

V一 …… 此处隐藏：3254字，全部文档内容请下载后查看。喜欢就下载吧 ……