高效液相色谱原理和操作详解

高 效 液 相 色 谱

我国药典收载高效液相色谱法项目和数量比较表：

鉴于HPLC应用在药品分析中越来越多，因此每一个药品分析人员应该掌握并应用HPLC。

I．概论 ............................................................................................................................................. 2

一、液相色谱理论发展简况 ........................................................................................................... 2

二、HPLC的特点和优点 .............................................................................................................. 2

三、色谱法分类............................................................................................................................... 3

四、色谱分离原理........................................................................................................................... 3

II．基本概念和理论 ........................................................................................................................ 5

一、基本概念和术语....................................................................................................................... 5

二、塔板理论................................................................................................................................... 8

三、速率理论（又称随机模型理论） ........................................................................................... 9

III．HPLC系统 ............................................................................................................................. 10

一、输液泵..................................................................................................................................... 11

二、进样器..................................................................................................................................... 13

三、色谱柱..................................................................................................................................... 14

四、检测器..................................................................................................................................... 17

五、数据处理和计算机控制系统 ................................................................................................. 20

六、恒温装置................................................................................................................................. 20

IV．固定相和流动相 .................................................................................................................... 20

一、基质（担体）......................................................................................................................... 20

二、化学键合固定相..................................................................................................................... 22

三、流动相..................................................................................................................................... 23

1．流动相的性质要求 ........................................................................................................... 23

2．流动相的选择 ................................................................................................................... 24

3．流动相的pH值 ................................................................................................................ 24

4．流动相的脱气 ................................................................................................................... 25

5．流动相的滤过 ................................................................................................................... 25

6．流动相的贮存 ................................................................................................................... 26

7．卤代有机溶剂应特别注意的问题 ................................................................................... 26

8．HPLC用水 ....................................................................................................................... 26

V．HPLC应用............................................................................................................................... 27

一、样品测定 ......................................................................................................................... 27

二、方法研究 ......................................................................................................................... 27

附件：高效液相色谱法（HPLC）复核细则 .............................................................................. 28

一、对起草单位的要求： ............................................................................................................. 28

二、对复核单位的要求： ............................................................................................................. 28

I．概论

一、液相色谱理论发展简况

色谱法的分离原理是：溶于流动相(mobile phase)中的各组分经过固定相时，由于与固定相(stationary phase)发生作用（吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和）的大小、强弱不同，在固定相中滞留时间不同，从而先后从固定相中流出。又称为色层法、层析法。

色谱法最早是由俄国植物学家茨维特（Tswett）在1906年研究用碳酸钙分离植物色素时发现的，色谱法(Chromatography)因之得名。后来在此基础上发展出纸色谱法、薄 …… 此处隐藏：18778字，全部文档内容请下载后查看。喜欢就下载吧 ……