高效液相色谱原理和操作详解
时间:2025-07-11
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高 效 液 相 色 谱
我国药典收载高效液相色谱法项目和数量比较表:
鉴于HPLC应用在药品分析中越来越多,因此每一个药品分析人员应该掌握并应用HPLC。
I.概论 ............................................................................................................................................. 2
一、液相色谱理论发展简况 ........................................................................................................... 2
二、HPLC的特点和优点 .............................................................................................................. 2
三、色谱法分类............................................................................................................................... 3
四、色谱分离原理........................................................................................................................... 3
II.基本概念和理论 ........................................................................................................................ 5
一、基本概念和术语....................................................................................................................... 5
二、塔板理论................................................................................................................................... 8
三、速率理论(又称随机模型理论) ........................................................................................... 9
III.HPLC系统 ............................................................................................................................. 10
一、输液泵..................................................................................................................................... 11
二、进样器..................................................................................................................................... 13
三、色谱柱..................................................................................................................................... 14
四、检测器..................................................................................................................................... 17
五、数据处理和计算机控制系统 ................................................................................................. 20
六、恒温装置................................................................................................................................. 20
IV.固定相和流动相 .................................................................................................................... 20
一、基质(担体)......................................................................................................................... 20
二、化学键合固定相..................................................................................................................... 22
三、流动相..................................................................................................................................... 23
1.流动相的性质要求 ........................................................................................................... 23
2.流动相的选择 ................................................................................................................... 24
3.流动相的pH值 ................................................................................................................ 24
4.流动相的脱气 ................................................................................................................... 25
5.流动相的滤过 ................................................................................................................... 25
6.流动相的贮存 ................................................................................................................... 26
7.卤代有机溶剂应特别注意的问题 ................................................................................... 26
8.HPLC用水 ....................................................................................................................... 26
V.HPLC应用............................................................................................................................... 27
一、样品测定 ......................................................................................................................... 27
二、方法研究 ......................................................................................................................... 27
附件:高效液相色谱法(HPLC)复核细则 .............................................................................. 28
一、对起草单位的要求: ............................................................................................................. 28
二、对复核单位的要求: ............................................................................................................. 28
I.概论
一、液相色谱理论发展简况
色谱法的分离原理是:溶于流动相(mobile phase)中的各组分经过固定相时,由于与固定相(stationary phase)发生作用(吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和)的大小、强弱不同,在固定相中滞留时间不同,从而先后从固定相中流出。又称为色层法、层析法。
色谱法最早是由俄国植物学家茨维特(Tswett)在1906年研究用碳酸钙分离植物色素时发现的,色谱法(Chromatography)因之得名。后来在此基础上发展出纸色谱法、薄 …… 此处隐藏:18778字,全部文档内容请下载后查看。喜欢就下载吧 ……
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