TSP高效液相色谱仪(P2000/UV3000)使用操作规程

TSP高效液相色谱仪（P2000/UV3000）

使用操作规程

一、目的：建立高效液相色谱仪的标准操作规程，保证标准操作。

二、范围：本标准适用于高效液相色谱法进行的检测。

三、责任者：QC检验员对本标准的实施负责。

四、程序：

1、操作方法：

1.1 开机检测前的准备工作：熟悉检验标准，按标准要求配制流动相，并经0.45um的微孔滤膜滤过。进入液相色谱仪的其它溶剂也要经过过滤，包括水及色谱级的溶剂，如色谱纯乙腈和二甲基甲酰胺等。

1.2 开机测样：

1.2.1 将B通道过滤头放入已过滤、脱气处理过的水中，打开脱气机后面板的开关，并打开前面板上的开关（先扳到RUN位置，再扳到AUTO位置，听到响声即可，不可用力过大）使脱气机开始脱气。

1.2.2 打开色谱泵（P2000）后面板开关，前面显示屏亮，打开前面板，将旁通阀打开，按清洗键（无字），用“+”或“-”选择B通道，按“ENTER”键使光标处在“FLOW”下,按“+”选择流速，按“ENTER”使光标处在“TIME”下，按“+”选择时间（一般开机时选“1”即可），按“ENTER”键，泵开始运转（其目的是使从管路中渗入气泡的液体不经过色谱柱）。当泵停止时关闭旁通阀（用力不要太大，关闭即可），盖上前盖。按“STATUS”键，再按“▼”键两次，再按“▲” 键选择“B”通道并使其下边的数字为100（做梯度时可按其比例调整）。按“ENTER”使光标处在“FLOW”下，按“+”或“-”选择数值（一般情况下选“1.00”即可），然后按“ENTER”，色谱泵即开始运转。

1.2.3 如准备测样时，于测样前40分钟时打开计算机，打开检测器UV3000后面板开关，打开控制器SN4000后面板开关。在计算机桌面上左键快速双击色谱工作站，然后双击“Istrument 1”，单击屏幕第二行“control”，单击“instrument status”，单击“P2000”使色谱泵P2000与计算机连接。然后单击屏幕第二行“method”，单击

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“instrumentsetup”，单击“P2000”选择流速、A通道或B通道及其比率（一般设“100”）、时间。单击UV3000选择波长及时间（单波长选择“single waveleng”，双波长选择“dual wavelengtl”，扫描选“scanning”）。然后在屏幕第二行单击“file”、单击“method”、单击“save”，再在屏幕第二行单击“control”、单击“download method”，此时仪器设置完毕。让检测器预热至少40分钟。

1.2.4 柱子平衡一段时间后单击屏幕第二行“control”，单击“preview run”看色谱图否是一条平行的直线，如是直线时说明色谱柱已平衡好了，用打印机打下该图（按打印机最右边的按钮打开打印机使自检约1分钟。将鼠标光标放在色谱图上，单击右键，在所出现的框中单击“Utilitis”、再单击“Print”。）。要进样时单击屏幕第二行“control”，单击“stop run”，再单击屏幕第二行 “control”，单击“single run”，单击“C:\ChromQuest”并在其后加上\data，单击“C:\ChromQuest”下一行，并输入所要测的样品的名称及批号，然后按“start”。此时计算机已准备就序。进样时先将微量注射器用样品溶液洗涤多次，吸入样品溶液（注意不要有气泡），将六通阀逆时针方向扳动（此时六通阀定量环与流路系统断开），把样品溶液按该品种项下规定的体积注入六通阀，然后再将六通阀按顺时针方向扳动（此时样品溶液被流动相带入色谱柱），计算机屏幕上即出现色谱图。当色谱图绘制完毕想要停止绘图时，单击屏幕第二行“control”，单击“stop run”即可。单击屏幕第二行“Analysis”再单击其下的“Analysis”，色谱图即可被分析。打印色谱图。有时需要峰高时，单击右键，在所出现的框中单击“Annotations”，单击“Height”，单击绿色向右键头，单击“确定”即可。不需要时单击红色向左键头，单击“确定”。

1.3 关机：

1.3.1 测样完毕，按“STOP”关闭色谱泵换上水再按“RUN”打开色谱泵，用水将管路及色谱柱中缓冲盐充分冲洗干净以防腐蚀，再用甲醇冲洗。

1.3.2 关闭计算机所有窗口；然后先关控制器，再关检测器；关闭色谱泵及脱气机。

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1.4 填写色谱柱及仪器使用记录。

2、清洁：及时清理现场，将仪器表面擦拭干净。

3、保养：定期请专门的计量人员进行维修保养。

4、 注意事项：

4.1 每次测样前都要先换上10%甲醇冲洗约40分钟，然后再换上带有缓冲盐的液动相。

4.2 每次测完样都要先换上10%甲醇充分冲洗带有缓冲盐的流动相。

4.3 除另有规定外，柱温为室温。如柱效稍低，可适当提高柱温，使柱温有所提高。

4.4 流动相及供试品溶液需用过滤器滤过后使用或进样，流动相先经脱气处理后才能使用。

4.5 色谱柱保存时使填充剂处在湿润状态，两端密塞，可根据仪器说明书要求保存。如C18柱可在甲醇中保存，硅胶可在已烷中保存等。