高效液相色谱法测定人血清中格列吡嗪浓度

建立了人血清中格列吡嗪浓度的HPLC测定方法,为研究格列吡嗪的代谢动力学及相对生物利用度提供了方法。采用Oasis HLB萃取小柱对血清样品进行处理,格列齐特为内标,C18为固定相。流动相为V(乙腈)∶V(0.08%三乙胺)=40∶60水溶液;H3PO4调节pH为3.5,流速1.0 mL/min,柱温30℃,检测波长：225 nm。在12.5-1000μg/L的质量浓度范围内,格列吡嗪与内标峰的比值与质量浓度呈良好的线形关

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第 2卷第 2 6期 20年 2 07月

分析试验室C i￣ Ju lo n ls hn o ma fA ay

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高效液相色谱法测定人血清中格列吡嗪浓度汤建林，王璐，向荣凤，徐颖，黄永平，周世文

(第三军医大学新桥医院国家药品临床研究基地，庆 403)重 007摘要：建立了人血清中格列吡嗪浓度的 H L P C测定方法，为研究格列吡嗪的代

谢动力学及相对生物利用度提供了方法。采用 Os L aiH B萃取小柱对血清样品 s进行处理，列齐特为内标，。固定相。流动相为 (格 C为乙腈 ) v 0 0%三乙： ( .8 胺 ) 06:4:0水溶液；H P 4节 p 3O调 H为 3 5流速 10m/ i,柱温 3 ., . Lm n O℃,检测波长： 2 I。 1 .~10 gL的质量浓度范围内，格列吡嗪与内标峰的比 2 5n在 2 5 00v/ n值与质量浓度呈良好的线形关系(=09 5 )格列吡嗪平均回收率为 9 .%, r .9 9; 68 批间、内 R D均小于 6检出限为 1 . J/ SN≥3。方法可用于药物代批 S%, 2 5/ L(/ . g )

谢动力学及生物等效性的研究。

关键词：格列吡嗪；高效液相色谱法；血清样品；药动学中图分类号：677 05 . 文献标识码： A文章编号：00o2 (0r 0.8-5 10.70 2O )2040 7

格列吡嗪 (l id )一种亲脂性弱酸，为第 gp i是 iz e

1实验部分 I I仪器与试剂 .

2磺酰脲类口服降血糖药物，降糖机制主要是代其直接刺激胰岛 I细胞的分泌功能和强化细胞受体 3对胰岛素的敏感性，是治疗非依赖型糖尿病有效且安全的药物。建立准确灵敏的分析方法测定血中药物浓度，仅是血药浓度监测的需要，同时不也为认知药物在体内的分布、排泄和药物代谢动力学提供了方法学保证。目前有关格列吡嗪血药

Wa r一60 ts 0E型高效液相色谱系统 ( 96型 e配 9 D D检测器， 1p s自动进样器及 Mien m 2 A 77l型 u lni 3 l u

色谱管理软件， t公司， S )色谱柱： i Wa r e s UA; Da .m niCs (,10In

. i id,马公 os t 5 l柱 5 l×46ml . .迪 t l l司 )保护柱：C;柱芯 ( l×3 0 ml 4 n l . i,迪马公 n l

司);MC一20 1S型电子天平 (度 0 0 a,Sr.精 .1n g ao t rs司 ) P一5型酸度计 (atis司 ) i公 u;P 0 Srr公 ou;高速

浓度测定的方法主要包括：H L,L P C C—MS等。其中 Z agi h i hnp gJ n L n o n等采用 L C—M S方法测定

离心机 ( bo公司) L A bt t;H B固定相萃取小柱 (0 3m/L gm,Wa r公司) ii r超纯水系统。 t e s,Mlp e lo格列吡嗪对照品 (度 9 .%,号：12 1 纯 95批 08~ 0 0,国药品生物制品检定所 )列齐特对照 01中；格

了经平衡透析处理后血浆中总的和游离格列吡嗪浓度，虽可达到较高的灵敏度，其检出限为 1v/,由于受仪器设备的限制，多的报道是采 g但 L更

用 H L外检测的方法。究主要集中在血液样 P C紫研品的处理方法上，包括采用苯 l、二氯甲烷 b、乙 2 J J醚等的液液萃取，固相萃取] a 4] 6,ws剂直 h试接除蛋白 8。本文在参考已有文献报道的基础等

品 (度 9 .%,批号：00 31,浙江九州药纯 94 4503业)。乙腈、甲醇均为色谱纯 (ud k& Jcsn公 Bri c ako

司)其余所用试剂均为分析纯；;水为超纯水 ( i M.1pr) lo。 i e 1 2实验方法 .

上，建立了以固相萃取法 (P ) SE处理血样，以格列齐特为内标的 H L P C测定人血清中格列吡嗪浓度的方法。研究了样品萃取条件和色谱行为中流动相的选择。

12 1标准溶液及质控样品的配制 ..